HepG2.2.15細胞
HepG2.2.15細胞是一款適配科研實驗場景的人肝癌細胞系,可用于多種肝臟疾病及抗病毒相關科研實驗的開展,為科研工作者提供穩(wěn)定、可靠的實驗材料支持。細胞經過嚴格的質量管控,篩選與驗證流程規(guī)范,確保細胞活性穩(wěn)定、純度達標,適配常規(guī)科研實驗需求。本產品僅用于科研用途,不用于臨床診斷等其他用途,相關實驗結果僅作為科研參考,不構成任何診斷意見。
細胞相關原理
該細胞為穩(wěn)定整合乙肝病毒(HBV)基因組的人肝癌細胞系,由HepG2細胞轉染HBV全基因組獲得,具有典型的上皮細胞樣形態(tài),呈貼壁生長特性,細胞形態(tài)規(guī)則、邊界清晰,細胞核大而明顯,指數(shù)增殖期群體倍增時間約為48h。該細胞可穩(wěn)定表達乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)及HBV DNA,其生物學特性與肝癌及乙肝病毒感染的臨床病理特征高度契合,可用于乙肝病毒復制機制、抗病毒類藥物篩選、肝癌發(fā)病機制等相關研究,能模擬體內乙肝病毒感染肝癌細胞的生長、增殖及應答特性,為科研實驗提供真實可靠的細胞模型支撐,保障實驗結果的科學性與重復性[8]。
細胞特點
細胞活性穩(wěn)定,傳代能力良好,在規(guī)定培養(yǎng)條件下可穩(wěn)定增殖,保障實驗的連續(xù)性與穩(wěn)定性,經優(yōu)化培養(yǎng)條件后復蘇率可顯著提升,復蘇后細胞活率可達到80%以上,符合藥典相關標準。形態(tài)特征典型,呈上皮細胞樣貼壁生長,形態(tài)規(guī)則、排列均勻,邊界清晰,便于顯微鏡下觀察與形態(tài)學分析。培養(yǎng)便捷,適配常規(guī)DMEM培養(yǎng)基(含2 mM L-谷an酰胺和Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM丙酮酸鈉)添加10%胎牛血清培養(yǎng),無需特殊實驗設備,可節(jié)省實驗準備與操作時間,適配不同規(guī)模的科研實驗需求。適用性強,可用于乙肝病毒復制與調控、抗病毒類藥物篩選與敏感性檢測、肝癌發(fā)病機制、肝臟相關信號通路研究等多種科研方向,是乙肝及肝癌基礎研究與藥物研發(fā)的常用細胞模型。穩(wěn)定性佳,在規(guī)定儲存與培養(yǎng)條件下可保持良好的細胞狀態(tài)及乙肝病毒表達特性,便于科研實驗的統(tǒng)籌規(guī)劃與開展。
適用實驗場景
本細胞適用于乙肝病毒復制機制研究、抗病毒類藥物篩選與敏感性檢測、肝癌發(fā)病機制研究,以及肝臟相關信號通路調控等多種科研實驗場景(具體細胞培養(yǎng)、傳代、復蘇方法請參考產品說明書)。細胞適用性已通過相關驗證,可滿足生命科學基礎研究、乙肝及肝癌藥物研發(fā)等多數(shù)科研場景需求,為科研工作者開展乙肝病毒及肝癌相關的多維度實驗研究,提供穩(wěn)定、可靠的細胞材料支持,同時可用于細胞冷凍保存相關技術的驗證實驗。
儲存與注意事項
儲存方面,未復蘇細胞需按照產品標簽所示條件冷凍儲存(通常為-196℃液氮環(huán)境),具體儲存溫度與條件以產品外包裝標簽及說明書為準,可添加含10%DMSO的抗凍保護劑提升復蘇率,選擇對數(shù)生長期、活力≥95%的細胞進行凍存,凍存液采用95%培養(yǎng)液+5%DMSO配制,避免冰晶損傷細胞結構導致活性下降及乙肝病毒表達特性改變[7]。復蘇后的細胞需及時接種培養(yǎng),控制好復蘇溫度與操作節(jié)奏,37℃水浴快速解凍后盡快離心去除DMSO,避免長時間放置影響細胞活性。所有細胞需在保質期內使用,過期產品嚴禁使用,保質期以產品外包裝標簽標注為準,臨近有效期的細胞建議先進行復蘇驗證活性,長期儲存的細胞需定期復蘇檢測穩(wěn)定性及乙肝病毒表達情況。
注意事項:本產品僅供體外科研使用,不用于臨床診斷;儲存和使用過程中需嚴格遵循細胞培養(yǎng)規(guī)范,控制好培養(yǎng)環(huán)境溫濕度(37℃、5% CO?),維持培養(yǎng)液pH在7.2~7.4,避免細胞受潮、污染或溫度波動;細胞復蘇、傳代過程中需規(guī)范操作,傳代時用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA處理,避免反復凍融,防止細胞損傷;實驗所用耗材需一次性使用,嚴禁混用,避免不同細胞交叉污染;正式實驗時需設置空白對照與陰性對照,確保實驗準確性;若細胞出現(xiàn)異常形態(tài)、增殖緩慢、污染等情況,嚴禁使用;培養(yǎng)過程中需定期觀察細胞狀態(tài),及時傳代,傳代比例以1:3至1:6為宜,每周更換2次培養(yǎng)液,避免細胞密度過高影響生長狀態(tài)及乙肝病毒表達[5][7]。
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