瘦素ELISA試劑盒
瘦素ELISA試劑盒用于體外定量檢測人、大鼠、小鼠等物種樣本中瘦素(Leptin)的表達水平。瘦素是一種主要由脂肪細胞分泌的多肽類激素,核心功能是調(diào)控機體能量代謝、脂肪儲存及食欲抑制,通過與下丘腦瘦素受體結(jié)合,維持機體能量平衡,其表達異常與肥胖、糖尿病、代謝綜合征、多囊卵巢綜合征、心血管疾病及腫瘤等密切相關(guān),是代謝紊亂相關(guān)疾病研究、肥胖機制探索、藥物篩選及臨床輔助診斷的重要生物標志物,適用于臨床醫(yī)學、分子生物學、免疫學、內(nèi)分泌學等科研及臨床檢測方向,為代謝相關(guān)研究與臨床輔助診斷提供標準化、高特異性的檢測工具,助力疾病機制探索與診療效率提升。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)原理,專門用于樣本中瘦素(Leptin)的定量檢測,無需細胞培養(yǎng)相關(guān)操作。檢測環(huán)節(jié),將抗瘦素特異性抗體包被于微孔板表面,形成固相抗體;向微孔中加入待測樣本(血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、脂肪組織勻漿液等),樣本中的瘦素與固相抗體特異性結(jié)合,形成抗體-抗原復合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白后,加入酶標抗Leptin檢測抗體,與復合物特異性結(jié)合形成夾心結(jié)構(gòu);再次洗滌后,加入底物溶液,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強度與樣本中瘦素的濃度呈正相關(guān);最后通過酶標儀測定OD值,結(jié)合標準曲線即可計算出樣本中瘦素的具體表達水平,檢測過程符合ELISA實驗規(guī)范,保障結(jié)果精準可靠。
產(chǎn)品特點
本試劑盒具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、穩(wěn)定性好、適用性廣等核心特點。試劑盒配套的包被抗體與酶標檢測抗體經(jīng)過嚴格篩選與優(yōu)化,可特異性結(jié)合瘦素,有效避免與其他多肽類激素及雜蛋白的交叉反應(yīng),保障檢測特異性;檢測靈敏度高,可精準檢測到樣本中微量瘦素,最di
檢測限符合科研及臨床檢測需求,能有效捕捉機體能量代謝異常時瘦素的細微表達變化;操作流程簡潔,無需復雜實驗設(shè)備,遵循常規(guī)ELISA操作步驟即可完成,無需細胞培養(yǎng)相關(guān)操作,降低實驗門檻,適配各類實驗室使用;批內(nèi)、批間一致性高,試劑活性穩(wěn)定,可有效保障實驗數(shù)據(jù)的重復性與可比性;適配血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、脂肪組織勻漿液等多種樣本類型,可用于人、大鼠、小鼠等不同物種的Leptin檢測,適用于代謝機制研究、肥胖篩查、疾病監(jiān)測、減肥及代謝相關(guān)藥物篩選等多種場景,適用范圍廣泛。 適用樣本類型
可用于人、大鼠、小鼠等物種的多種樣本中瘦素(Leptin)的定量檢測,適配樣本類型包括:血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、脂肪組織勻漿液、腦脊液等。(具體樣本處理、檢測步驟及濃度計算細節(jié)請參考產(chǎn)品說明書)
樣本處理與檢測時需嚴格遵循無菌操作規(guī)范,避免樣本及試劑污染;血清樣本需室溫放置2小時或4℃過夜析出,4℃、1000×g離心20分鐘取上清,避免溶血,溶血會干擾檢測結(jié)果;血漿樣本需使用適配抗凝劑(推薦EDTA或檸檬酸鈉抗凝),采集后30分鐘內(nèi)4℃、1000×g離心15分鐘取上清,避免使用肝素(可能干擾抗原抗體結(jié)合);細胞培養(yǎng)上清、脂肪組織勻漿液需離心去除細胞碎片及雜質(zhì)后使用,制備過程中需保持樣本低溫,避免瘦素降解;所有樣本需分裝保存,避免反復凍融,短期可置于-20℃,長期建議-80℃密封保存,檢測前恢復至室溫并充分混勻,保障檢測結(jié)果準確性;標準品需按說明書梯度稀釋,嚴格遵循稀釋流程,避免濃度偏差影響標準曲線繪制。
儲存與注意事項
儲存條件
試劑盒需于2~8℃避光密封保存,嚴禁冷凍、反復凍融及劇烈震蕩,防止試劑活性喪失;包被板需密封保存,避免受潮、污染及抗體活性下降;酶標試劑、底物溶液需避光保存,底物溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免顯色異常;未用完的試劑需按要求密封存放,做好標記;從冰箱取出后需在室溫平衡30分鐘以上再進行使用,避免溫度驟變影響抗原抗體結(jié)合效率,同時防止試劑變性及瘦素相關(guān)抗原活性丟失。
注意事項
1. 所有實驗操作需嚴格遵循無菌規(guī)范,實驗器具需提前滅菌處理,加樣時更換吸嘴,避免交叉污染,影響檢測結(jié)果;實驗過程中需保持樣本及試劑低溫,避免瘦素降解;
2. 樣本處理需嚴格遵循操作規(guī)范,避免溶血、雜質(zhì)殘留,樣本制備及保存過程中需保持低溫,避免反復凍融,否則會導致瘦素降解、變性,影響檢測準確性;底物溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用,顯色反應(yīng)需在避光條件下進行,嚴格控制反應(yīng)時間;
3. 檢測過程中需嚴格控制孵育溫度(推薦37℃)與時間,孵育時需用封板膜密封微孔板,防止蒸發(fā)和邊緣效應(yīng);洗滌步驟需充分,避免未結(jié)合的抗體殘留,否則會導致假陽性;標準曲線繪制需嚴格遵循說明書,確保濃度梯度準確,保障定量檢測的可靠性;
4. 實驗操作需嚴格遵循實驗室安全規(guī)范,妥善處理廢棄樣本、試劑及耗材,操作相關(guān)試劑時需做好個人防護措施;樣本及試劑中嚴禁加入NaN3,以免抑制酶活性導致假陰性結(jié)果;避免樣本與強氧化劑、重金屬離子接觸,防止干擾瘦素與抗體的結(jié)合及瘦素降解。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。