8-iso-PGF2α試劑盒ELISA
8-iso-PGF2α試劑盒ELISA是一款專為8-異前列腺素F2α(8-Isoprostaglandin F2α,簡稱8-iso-PGF2α)定量檢測設(shè)計的高特異性、高靈敏度實驗試劑組合,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢測、氧化應(yīng)激研究、心血管疾病及炎癥研究等領(lǐng)域,可實現(xiàn)血清、血漿、尿液、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液等各類樣本中8-iso-PGF2α含量的精準定量檢測。該試劑盒采用雙抗體一步夾心法ELISA技術(shù),組分經(jīng)過嚴格篩選與優(yōu)化,針對脂質(zhì)類標(biāo)志物檢測特性優(yōu)化反應(yīng)體系,穩(wěn)定性強、操作便捷,無需復(fù)雜預(yù)處理步驟,能有效捕捉樣本中微量8-iso-PGF2α的特異性信號,適配低體積樣本檢測場景,為實驗人員提供高效、可靠的檢測工具,助力氧化應(yīng)激相關(guān)實驗結(jié)果的精準獲取與數(shù)據(jù)分析,本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
檢測原理
本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)的核心原理,采用雙抗體一步夾心法實現(xiàn)對8-iso-PGF2α的定性與定量檢測,通過特異性免疫反應(yīng)精準捕獲脂質(zhì)類目標(biāo)物質(zhì),有效降低脂質(zhì)干擾與非特異性信號。試劑盒預(yù)先將純化的8-iso-PGF2α捕獲抗體包被于酶標(biāo)微孔板上,形成固相抗體;實驗時,向微孔中依次加入待測樣本、標(biāo)準品及HRP標(biāo)記的8-iso-PGF2α檢測抗體,樣本中的8-iso-PGF2α?xí)c固相抗體、HRP標(biāo)記檢測抗體特異性結(jié)合,形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"夾心復(fù)合物;經(jīng)過徹di
洗滌去除未結(jié)合的游離試劑及樣本中的干擾脂質(zhì)后,加入TMB顯色底物(部分試劑盒含底物A、B組分),TMB在HRP的催化下轉(zhuǎn)化為藍色,隨后在終止液(2M硫酸)的作用下轉(zhuǎn)化為最終的黃色。該黃色產(chǎn)物的顏色深淺與樣本中8-iso-PGF2α的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),結(jié)合標(biāo)準曲線即可實現(xiàn)對樣本中8-iso-PGF2α含量的精準定量,確保檢測結(jié)果的準確性與科學(xué)性。 產(chǎn)品特點
1. 高靈敏度:檢測體系經(jīng)過脂質(zhì)標(biāo)志物適配優(yōu)化,最di
檢測限可低至1.0 pg/mL,能精準捕捉微量樣本中低濃度的8-iso-PGF2α,有效避免漏檢,適配微量實驗需求,可滿足氧化應(yīng)激低表達樣本的檢測需求; 2. 特異性強:試劑盒中的捕獲抗體與檢測抗體均對8-iso-PGF2α具有高度特異性,可有效避免與其他前列腺素(如PGF2α、PGE2)、脂質(zhì)過氧化物及生物小分子發(fā)生交叉反應(yīng),降低背景信號,提升檢測結(jié)果的特異性與可靠性,特異性交叉反應(yīng)率均低于5%;
3. 操作便捷:組分搭配合理,試劑均為即用型或簡單稀釋后即可使用,針對脂質(zhì)樣本優(yōu)化預(yù)處理建議,實驗流程簡潔,可快速完成加樣、孵育、洗滌、顯色、檢測等操作,全程檢測時間約3.5小時,節(jié)省實驗時間;
4. 穩(wěn)定性佳:試劑盒各組分均經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制,批內(nèi)變異系數(shù)小于10%,批間變異系數(shù)小于15%,試劑活性穩(wěn)定,針對脂質(zhì)標(biāo)志物特性優(yōu)化儲存條件,能有效保障實驗結(jié)果的重復(fù)性與一致性,具備良好的回收率(85%-115%)與線性稀釋特性;
5. 適配性廣:可兼容普通酶標(biāo)儀(450nm波長),適配血清、血漿、尿液等多種樣本類型,檢測范圍可達10 pg/mL - 1000 pg/mL,適用于科研領(lǐng)域各類氧化應(yīng)激相關(guān)8-iso-PGF2α檢測實驗,部分規(guī)格可根據(jù)需求定制檢測范圍。
適用樣本類型
本試劑盒適用于多種來源的微量樣本,包括但不限于:血清、血漿、尿液、組織勻漿(肝、腎、心肌等組織)、細胞培養(yǎng)上清液、肺泡灌洗液及純化后的脂質(zhì)樣品等。(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書),樣本處理過程中需注意避免樣本溶血、降解、污染,避免反復(fù)凍融,同時避免使用含NaN?的樣本(NaN?會抑制HRP活性);血清/血漿樣本需室溫放置2小時或4℃過夜析出,4℃1000×g離心20min收集上清,避免脂血樣本干擾;尿液樣本需4℃1500×g離心10min去除沉淀,可加入抑制劑防止8-iso-PGF2α降解;組織勻漿建議按1:9重量體積比用預(yù)冷PBS(0.01M,pH=7.4)制備,可加入抗氧化劑(如丁基羥基茴香醚BHA)保護8-iso-PGF2α不被氧化,確保檢測結(jié)果的準確性,所有樣本需離心去除沉淀或懸浮物,保證樣本為澄清液體。
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 試劑盒未開封時,需于2-8℃冷藏、避光儲存,避免冷凍、暴曬及溫度劇烈波動,嚴禁置于高溫、潮濕環(huán)境,保質(zhì)期通常為6個月,具體以產(chǎn)品外包裝標(biāo)簽為準;
2. 試劑盒開封后,各組分需密封保存,酶標(biāo)包被板需裝入自封袋并加入干燥劑,按說明書要求分別儲存(標(biāo)準品等敏感組分首ci
使用后建議分裝,于-20℃冷凍儲存),HRP標(biāo)記抗體、TMB底物等需避光保存,避免交叉污染,試劑盒中未使用的組分需及時放回冰箱保存,尤其注意脂質(zhì)相關(guān)試劑的密封防潮; 3. 試劑盒各組分開封后建議在規(guī)定時間內(nèi)用完,標(biāo)準品等液體組分避免反復(fù)凍融,超過有效期嚴禁使用;濃縮洗滌液若有結(jié)晶析出,稀釋時可水浴加溫助溶,不影響檢測效果;樣本收集后需立即處理,若1周內(nèi)不檢測,需分裝凍存于-20℃或-80℃,凍存樣本建議在1-6個月內(nèi)檢測完畢,避免8-iso-PGF2α氧化降解。
(二)注意事項
1. 實驗前需將試劑盒各組分從冷藏/冷凍環(huán)境中取出,在室溫(20-25℃)下平衡15-30分鐘,避免溫度驟變影響試劑活性與檢測結(jié)果,平衡后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,自配緩沖液、洗滌液需用pH計測量確保合規(guī)(pH值偏差需控制在±0.1),避免pH異常影響抗原抗體結(jié)合;
2. 操作過程中需保持實驗環(huán)境潔凈,建議在超凈工作臺內(nèi)進行,避免灰塵、氣溶膠污染試劑及樣本,所有操作器具需潔凈,配置不同濃度標(biāo)準品、加樣時需更換槍頭,避免交叉污染,降低實驗誤差,尤其注意避免脂質(zhì)污染試劑;
3. 微量加樣時需選用校準合格的移液器及配套槍頭,嚴格遵循加樣規(guī)范,加樣時將液體加于酶標(biāo)板孔底部,避免觸及孔壁,一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),避免氣泡產(chǎn)生與試劑殘留,確保加樣精準;
4. 不同批號的試劑盒組分不得混用,也不可與其他廠家試劑盒組分混用;試劑使用前需輕輕顛倒混勻,避免劇烈震蕩,防止試劑變性;底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已變藍的底物液不能使用,終止液加樣順序需與底物加樣順序一致,避免影響顯色效果與檢測結(jié)果;
5. 洗板時需確保盡量吸干孔內(nèi)液體,使用自動洗板機可增加30秒浸泡步驟提升精度,避免洗板不徹di
導(dǎo)致結(jié)果偏差,尤其需洗凈孔內(nèi)殘留的脂質(zhì)干擾物;溫育過程中不要讓微孔干燥,需正確使用封板膜;檢測前需消除板底殘留液體和手指印,避免影響OD值讀?。?/span> 6. 實驗過程中需做好個人防護,穿戴手套、口罩,避免試劑接觸皮膚與黏膜;試劑盒液體組分含防腐劑,需避免吸入煙霧;所有樣品、洗滌液和實驗廢棄物需按照實驗室規(guī)范妥善處理,若樣本可能傳播疾病,需嚴格按規(guī)定程序處理;
7. 嚴格按照產(chǎn)品說明書的實驗流程、試劑用量及孵育條件操作,顯色后需在15分鐘內(nèi)完成OD值測定,任何操作偏差都可能導(dǎo)致檢測結(jié)果失真;實驗時建議設(shè)置復(fù)孔與標(biāo)準曲線,提升數(shù)據(jù)可靠性;若樣本濃度高于zui高
標(biāo)準品濃度,需適當(dāng)稀釋后重新測定,稀釋過程需遵循規(guī)范,確保結(jié)果準確。 訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準。