關鍵詞:(原核)可溶蛋白表達服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌(原核)可溶蛋白表達服務|實驗技術服務原裝，質(zhì)量保證,*。
(原核)可溶蛋白表達服務|實驗技術服務——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時，我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面，我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產(chǎn)品品牌：(原核)可溶蛋白表達服務|實驗技術服務   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
實驗描述               
pCold-SUMO原核蛋白表達試劑盒所包含的原核表達載體(pCold-SUMO)是在pCold載體基礎上改造而成(HaiGene)，該載體啟動子(CS Promoter)來源于南極嗜冷細菌，在低溫下(15度)才能啟動蛋白的表達。低溫下細菌生長緩慢，使得蛋白合成速度減慢，從而zui大限度的提高了蛋白正確折疊的幾率，提高了蛋白可溶性表達，增強了活性蛋白的表達比率。該表達系統(tǒng)所包含的SUMO tag可以極大地提高小分子量蛋白的表達量，而且進一步提高了蛋白的可溶表達幾率。同時，pCold-SUMO原核蛋白表達試劑盒配備的SUMO Protease(含 6×His 標簽)可特異性去除SUMO tag，從而得到不含任何標簽的重組蛋白。TEE 信號肽可增強冷啟動子調(diào)控下目的蛋白的高表達。BL21(DE3)Chaprone E.coli 細菌中含有分子伴侶蛋白質(zhì)粒，其表達產(chǎn)物可協(xié)助重組蛋白正確折疊形成可溶活性蛋白。 分子伴侶蛋白質(zhì)粒為氯霉素抗性（chloramphenicol，Cmr）的表達受控于四環(huán)素（tetR）操縱子。
組分名稱    數(shù)量    保存
pCold-SUMO Vector (100 ng/μl)    50 μl    -20℃
SUMO Protease (10 U/μl)     100 μl    -70℃
10XSUMO Buffer    1 ml    -20℃
3M NaCl    0.5 ml    -20℃
BL21(DE3)Chaprone E.coli    100 μl    -70℃
pCold-SUMO Primer-F    100 μl    -20℃
pCold-SUMO Primer-R    100 μl    -20℃
主要特征
冷啟動子，低溫誘導表達，zui大限度地提高蛋白地可溶性
分子伴侶可協(xié)助蛋白的正確折疊
可大大的提高蛋白表達量
*的SUMO蛋白酶可切割SUMO標簽而得到不含任何多余氨基酸的蛋白
應用
包涵體蛋白的*解決方法，提高蛋白的可溶性優(yōu)化表達。
Fig . M. 中分子量蛋白Marker 1. 未誘導 
2. pET15b系統(tǒng)表達全菌體蛋白
3.pET15b系統(tǒng)表達上清液(可溶蛋白部分)
4.pCold-SUMO表達于BL21(DE3)全菌體蛋白
5.pCold-SUMO表達于BL21(DE3)上清液(可溶蛋白部分)
6.pCold-SUMO表達于BL21(DE3)chaprone全菌體蛋白
7.pCold-SUMO表達于BL21(DE3)chaprone上清液(可溶蛋白部分)
8.使用Ni-NTA Resin純化SUMO融合蛋白
9.使用SUMO酶切除SUMO tag后的目的蛋白
泳道2和3表明使用pET系統(tǒng)表達幾乎無可溶性蛋白表達，皆為包涵體；泳道4和5表明使用pCold-SUMO系統(tǒng)于BL21(DE3)菌中，可溶性蛋白表達約占40%；泳道6和7表明使用BL21(DE3)chaprone可進一步提高蛋白的可溶性表達。